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技術(shù)文章
正確配制培養(yǎng)基是微生物培養(yǎng)的基礎(chǔ)步驟之一
  微生物的生長,除了受本身的遺傳特性決定外,還受到許多外界因素的影響,如營養(yǎng)物濃度、溫度、水分、氧氣、pH等。微生物的種類不同,培養(yǎng)的方式和條件也不盡相同,其貯存方法也是很有講究的。
 
  細(xì)菌和其它生物一樣,大多數(shù)屬異養(yǎng)菌,必須從周圍環(huán)境中攝取營養(yǎng),進(jìn)行新陳代謝及生長繁殖等生命活動。人為的提供細(xì)菌生長繁殖所需的營養(yǎng)物質(zhì)(適宜的培養(yǎng)基)和創(chuàng)造適合細(xì)菌生長繁殖的有利條件如溫度、濕度、氣體等,能使細(xì)菌在體外迅速生長繁殖。
 
  正確配制培養(yǎng)基是微生物培養(yǎng)的基礎(chǔ)步驟之一,實(shí)驗(yàn)室使用各種基礎(chǔ)成分制備培養(yǎng)基時(shí),應(yīng)按照配方準(zhǔn)確配制,并記錄相關(guān)信息,如:培養(yǎng)基名稱和類型及試劑級別、每個(gè)成分物質(zhì)含量、制造商、批號、pH、培養(yǎng)基體積(分裝體積)、無菌措施(包括實(shí)施的方式、溫度及時(shí)間)、配置日期、人員等,以便溯源。
 
  培養(yǎng)基滅菌常見的滅菌方法有:
 
  1.化學(xué)物質(zhì)滅菌:藥物與微生物細(xì)胞中的成分反應(yīng),使蛋白質(zhì)變性、酶失活;使用范圍:器皿、雙手和實(shí)驗(yàn)室、無菌室的環(huán)境滅菌,不能用于培養(yǎng)基滅菌;常用的有酒精、來蘇爾等。
 
  2.輻射滅菌:原理是利用高能量的電磁輻射與菌體核酸的光化學(xué)反應(yīng)造成菌體死亡;常用的有紫外線、X射線和γ射線,用于室內(nèi)空氣及器皿表面滅菌。
 
  3.干熱滅菌:原理是利用高溫對微生物有氧化、蛋白質(zhì)變性和電解質(zhì)濃縮作用而殺滅微生物;常用灼燒和電熱箱加熱,140-180℃ 1-2小時(shí),適于對玻璃及金屬用具及沙土管滅菌。
 
  4.濕熱滅菌:原理是直接用蒸汽滅菌,蒸汽在冷凝時(shí)能釋放出大量潛熱,蒸汽具有強(qiáng)大的穿透力,破壞菌體蛋白和核酸的化學(xué)鍵,使酶失活,微生物因代謝障礙而死亡,水煮常壓滅菌:100℃,或飽和蒸汽滅菌:一般121℃,30分鐘,適合培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備滅菌。
 
  5.過濾除菌:除菌原理是利用微生物不能透過濾膜除菌,方法是使用0.01~0.45 μm孔徑濾膜,用于壓縮空氣、酶溶液及其他不耐熱化合物溶液除菌。
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